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测定钙试剂致血清磷结果假性升高的原因及方法

作者:2015-08-15 14:11文章来源:未知

  全自动生化分析仪具有多项目、多样本快速处理的能力,但随着仪器检测速度的不断提升,同一仪器检测项目的不断增多,项目间的交叉污染现象就会突显。如果项目测试顺序安排不合理,且常规清洗不能有效消除时,未采取恰当的处理措施就会给检验结果的准确性带来严重影响。枣阳市第一人民医院医学检验科在日立7180 生化仪上增设血清磷测定项目后,室内质控测定值连续几天测定均值为1. 32,而实际均值为1. 06,经观察验证发现此干扰来自于血清钙试剂。钙试剂中含有高浓度的磷酸盐,在测定标本及质控时,钙的测定在磷的前面且中间只间隔着总胆汁酸项目,试剂针上的残留是造成此干扰主要原因。本文主要通过单测磷数据与不同处理措施的钙、磷同测数据的比较,验证各种处理措施的处理效果,寻找消除此干扰的最佳处理方式,以保证血清磷测定结果的重复性与准确性,为临床诊断与治疗提供可靠依据。

  1 材料和方法

  1. 1 标本

  随机选取2014 年3 月5 日健康体检者新鲜血清标本20 例,无溶血、脂血现象。随机选择2014 年3 月12 日含钙、磷两个检测项目的病人标本20 份,无溶血、脂血现象。

  1. 2 方法

  将20 份健康体检标本编号为1 ~ 20 号,先单独做血清磷测定并记录数据,设为( P0组) ; 再将钙、磷配对同测数据记为( P1组) ,接着分别设置特殊清洗( Probe < R1 > ,From Test < Ca > ,To Test P < water200 μL > ) 钙、磷配对同测数据记为( P2组) 、同时加( Probe < R1 > ,From Test < Ca > ,To Test P < wash1200 μL > ) 和( Probe < R1 > ,From Test < Ca > ,ToTest P < water 200 μL > ) 钙、磷配对同测数据记为( P3组) 、同时加( Probe < R1 > ,From Test < Ca > ,To Test P < wash2 200 μL > ) 和( Probe < R1 > ,FromTest < Ca > ,To Test P < water 200 μL > ) 钙、磷配对同测数据记为( P4组) ,共得到5 组血清磷的测定数据,将后4 组数据分别与P0组进行比较。调整测试顺序( 将先前测试顺序钙→总胆汁酸→磷,调整为磷→总胆汁酸→钙) 并加( Probe < R1 > ,From Test < All > ,To Test P < water 200 μL > ) 清洗后,记录随机选择的当天含钙、磷两个检测项目20 份病人标本的血清磷测定结果,记为( P标) ; 然后对这20份标本做血清磷的单独测定,记为( P单) ,再将两组数据进行比较。

  1. 3 仪器与试剂

  日立- 7180 全自动生化分析仪; 血清磷采用北京利德曼生化股份有限公司生产试剂盒( 磷钼酸盐法) ,血清钙采用厦门英科新创科技有限公司生产试剂盒( 偶氮胂Ⅲ法) 。

  1. 4 统计学方法

  采用SPSS 19 软件进行统计分析。正态分布数据以x ± s 表示,组间比较采用配对t 检验的方法进行统计学分析,P < 0. 05 为差异有统计学意义。

  2 结果

  2. 1 单独做血清磷测定( P0组) 与其它各组比较

  结果显示血清磷测定P0组为( 1. 06 ± 0. 17)mmol /L,P1组为( 1. 52 ± 0. 17 ) mmol /L,P2组为( 1. 33 ± 0. 18) mmol /L,P3组为( 1. 18 ± 0. 17) mmol /L,P4组为( 1. 15 ± 0. 16) mmol /L。P0组与其它各组比较差异均存在显著性意义( P < 0. 01) 。

  2. 2 标本磷与单测磷结果比较

  调整测试顺序并加( Probe < R1 > ,From Test ,To Test P < water 200 μL > ) 清洗后标本结果血清磷( 1. 09 ± 0. 189) mmol /L,与单测磷( 1. 07 ±0. 187) mmol /L 比较,差异无显著性意义,P > 0. 05。

  3 讨论

  全自动生化分析仪由于检测项目的增多,检测速度的不断提升,以及仪器老化清洗能力下降等因素的影响,由加样针、试剂针、搅拌棒以及比色杯所导致的携带污染就会不断增加。携带污染是指测定项目的试剂或样品的残留部分对后续项目结果的影响。其影响机制主要是: 前一项目的试剂或样品中含有下一项目的待测成分或者试剂中某物质能够参与下一个项目的反应以及影响下一个项目的反应条件等,从而对实验产生干扰。本文所研究的钙试剂对血清磷测定的干扰,就是因为钙试剂中含有的高浓度磷酸盐属于血清磷的待测成分,当试剂针清洗不彻底时,试剂针上微量的残余所导致。研究结果表明: 钙试剂对血清磷测定结果可造成非常严重的正干扰,通过加设特殊清洗的方法只能减小干扰的程度,而不能完全消除干扰; 又因可对血清磷测定产生干扰的项目很多,比如α - HBDH 及UA 等对磷测定有显著污染,分别达57. 6% 和15. 7%,原因也是由于这两个测试项目的试剂中含有磷成份( 磷酸盐缓冲液),只有在调整合适的测试顺序[7]并加( Probe < R1 > ,From Test < All > ,To Test P ) 清洗后才能完全消除干扰,为临床提准确可靠的诊疗依据。

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